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EVO视讯:生物医疗领域的凝胶渗透色谱GPC原理与操作指南

来源:雍贝融 日期:2025-03-13

在对各种生物医药产品中的农药残留和半挥发性有机物进行分析时,样品萃取物中通常会含有大分子物质。如果不去除这些物质,可能导致色谱柱的分离效率降低,进样口和色谱柱的使用寿命缩短,从而影响数据分析结果。因此,在分析农药残留和半挥发性有机物之前,必须进行有效的净化前处理。传统的前处理过程往往耗时较长,且溶剂消耗量大,因此,采用GPC(凝胶渗透色谱)成为一种必然趋势。

EVO视讯:生物医疗领域的凝胶渗透色谱GPC原理与操作指南

凝胶渗透色谱(GPC),也称为体积排斥色谱(SEC),是利用溶剂作为流动相,通过多孔填料(如多孔硅胶或多孔树脂)进行分离的液相色谱方法。GPC是液相色谱的一个分支,其分离组件为以多孔性凝胶为载体的色谱柱。这种凝胶的表面和内部蕴含大量大小不等的孔洞。GPC仪器的组成包括泵系统、自动进样系统、凝胶色谱柱、检测系统以及数据采集与处理系统。GPC的分离机制通常可用“空间排斥效应”来解释。当将含有样品的流动相(气体、液体或超临界流体)施加外力通过固定相表面时,样品中各组分会与两相进行不同程度的相互作用。与固定相作用强的组分流出的速度较慢,而与固定相作用弱的组分则流出的速度较快。由于流速的差异,各组分最终形成“带”或“区”,可以进行定性和定量分析。

操作指南中的谱图表现方式提供了柱后流出物浓度随保留值变化的信息,进而推断高聚物的平均分子量及其分布。根据所用凝胶的性质,凝胶渗透色谱可分为使用水溶液的凝胶过滤色谱法(GFC)和使用有机溶剂的凝胶渗透色谱法(GPC)。其分离过程仅依赖尺寸,大组分优先被洗出,而小组分则滞留时间较长。溶剂分子因体积较小,能够进入所有的凝胶孔洞,因此在色谱柱中最后排出,这也是与其他色谱法的主要不同点。

凝胶过滤色谱适合分析水溶液中的多肽、蛋白质、生物酶等生物分子,而凝胶渗透色谱主要用于高聚物(如聚乙烯、聚丙烯等)的分子量测定。

使用EVO视讯作为GPC方法的好处有:1. 相对分子量分布对聚合物性能的重要影响。2. 在相对分子质量分布(多分散性指数)成为人们关注的热点后,经典方法无法同时测定聚合物的分布。采用EVO视讯的凝胶渗透色谱可以改善测试条件,一次性测定聚合物的相对分子质量及其分布,使其成为常用且高效的技术。

常见问题解答:

  • 1. 溶剂的选择:应能溶解多种聚合物,不腐蚀仪器部件,并与检测器匹配。
  • 2. 激光光散射与凝胶色谱仪联用,可同时获得浓度谱图和散射光强谱图,从而计算分子量分布曲线和样品的各种平均分子量。
  • 3. 样品准备:激光光散射实验中,必须严格进行除尘,首先需对溶剂进行精馏和超滤。
  • 4. GPC色谱柱的选择:根据样品所溶解的溶剂和样品分子量范围选择合适的柱子。
  • 5. GPC仪器对载体的要求:良好的化学和热稳定性,机械强度高,流动阻力小,无试样吸附作用。
  • 6. 进样体积:建议为50-100μL(浓度在0.05%-0.5%之间)。
  • 7. GPC系统的平衡:在安装色谱柱前,需用流动相替换系统并进行冲洗,确保检测器流路清洁。

以上是关于EVO视讯在生物医药分析中的应用概述,希望能帮助您更好地理解并应用这一技术。

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